一、服務(wù)簡介
單個(gè)細(xì)胞在體外增殖六代以上,其后代所組成的細(xì)胞群體,成為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50以上的細(xì)胞,大小在0.3-1.0 mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力。各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變。克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個(gè)重要性狀。實(shí)驗(yàn)方法包括平板克隆形成實(shí)驗(yàn)和軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)。
二、技術(shù)流程
平板克隆形成實(shí)驗(yàn):適用于貼壁生長的細(xì)胞
1、取對數(shù)生長期的各組細(xì)胞,制備細(xì)胞懸液;
2、將細(xì)胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋,分別接種含培養(yǎng)液的皿中,培養(yǎng)2-3周;
3、經(jīng)常觀察,當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時(shí),終止培養(yǎng);
4、棄去上清液,4%多聚甲醛固定,GIMSA染色液染10-30 min;
5、計(jì)算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))× 100%;
6、結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析
軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn):適用于非錨著依賴性生長的細(xì)胞。
1、制備細(xì)胞懸液,梯度倍數(shù)稀釋;
2、分別制備1.2%和0.7%瓊脂糖溶液;
3、下層瓊脂凝固后放入37℃培養(yǎng)箱備用;
4、加入細(xì)胞懸液,待上層瓊脂凝固后,培養(yǎng)10-14天;
5、計(jì)算克隆形成率,克隆形成率 =(克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))× 100%;
6、結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析
三、服務(wù)說明 1、檢測細(xì)胞株(若實(shí)驗(yàn)室有,可免費(fèi)提供)。
2、待測毒性藥物(根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案有無)。
3、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案或參考文獻(xiàn)。
4. 若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務(wù)。
四、成果展示 
五、詢價(jià)及訂購
感謝您選擇我公司的細(xì)胞克隆形成服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。